Materiais e reagentes
- HPLC com detector UV ou de arranjo de diodos
- Coluna de troca iônica ou fase reversa com par iônico
- Cartuchos de extração em fase sólida (C8) e reagente de par iônico
- Padrão de Diquat
Procedimento
- CalibraçãoPreparar padrões de diquat em vários níveis e montar a curva.
- ExtraçãoCondicionar o cartucho de SPE com reagente de par iônico, passar a amostra e eluir o diquat em volume conhecido.
- InjeçãoInjetar o extrato no HPLC.
- DetecçãoLer em cerca de 308 nm (UV) e quantificar pela curva.
- Controle de qualidadeAnalisar branco de método e amostra fortificada em cada lote.
Cálculo
Curva de calibração y = a × C + b
- y: resposta do instrumento (área ou altura do pico)
- a: inclinação da curva
- b: intercepto da curva
- C: concentração do padrão
Concentração na amostra (extração) C = (Cext × Vext × FD) / Vam
- C: concentração na amostra (µg/L)
- Cext: concentração no extrato, obtida pela curva de calibração (µg/mL)
- Vext: volume final do extrato (mL)
- FD: fator de diluição do extrato (1 se não diluído)
- Vam: volume de amostra extraído (L)
Coleta e preservação
Coleta: Frasco de plástico âmbar ou vidro silanizado (diquat adsorve no vidro comum). Preservação: Se houver cloro residual, adicionar tiossulfato de sódio. Refrigerar a ≤ 6 °C e proteger da luz. Prazo: extrair em até 7 dias.
Cuidados e segurança
- Diquat é tóxico se ingerido ou inalado. Manusear padrões com luvas e em capela.
- Reagentes de par iônico e solventes da fase móvel são irritantes. Usar luvas e óculos.