Materiais e reagentes
- Espectrofotômetro (880 nm) com cubetas de 1 a 5 cm
- Erlenmeyer de 125 mL lavados com HCl diluído (nunca com detergente com fosfato)
- Reagente combinado (H₂SO₄, tartarato de antimônio e potássio, molibdato de amônio e ácido ascórbico), preparado no dia
- Indicador fenolftaleína e H₂SO₄ 5 N
- Solução padrão de fosfato
- Membrana de 0,45 µm (para fósforo dissolvido)
- Alternativa: fotômetro ou colorímetro digital com método do ácido ascórbico (PhosVer)
Procedimento
- AmostraMeça 50 mL da amostra (filtrada em 0,45 µm se for medir ortofosfato dissolvido) no erlenmeyer.
- AjusteAdicione 1 gota de fenolftaleína. Se ficar rosa, adicione H₂SO₄ 5 N gota a gota até descorar.
- ReagenteAdicione 8 mL do reagente combinado e misture.
- CorEspere no mínimo 10 e no máximo 30 minutos para a cor azul se formar.
- LeituraZere com um branco de reagentes e leia em 880 nm. Em amostra turva ou colorida, leia também um branco da amostra sem o reagente e desconte.
- CalibraçãoDetermine a concentração pela curva de padrões de fosfato. O resultado sai em mg/L de P.
- Alternativa digitalFotômetros com reagente em sachê dão o ortofosfato em minutos, para triagem; o laudo oficial segue o SM 4500-P E.
Cálculo
Conversão de unidade PO₄³⁻ (mg/L) = P (mg/L) × 3,066
- P: fósforo como P, resultado da curva
- 3,066: razão entre as massas molares do PO₄³⁻ e do P
Coleta e preservação
Frasco de vidro ou plástico lavado com HCl diluído. Para ortofosfato dissolvido, filtre em 0,45 µm logo após a coleta. Refrigere a cerca de 4 °C e analise em até 48 horas. Não use ácido para preservar ortofosfato.
Cuidados e segurança
- O reagente combinado contém ácido sulfúrico e antimônio: use luvas e óculos.
- Evite detergentes com fosfato na limpeza da vidraria, porque contaminam o resultado.