Materiais e reagentes
- Espectrofotômetro para 543 nm, com cubetas de 1 a 5 cm
- Reagente de cor (sulfanilamida, dicloridrato de N-(1-naftil)-etilenodiamina e ácido fosfórico)
- Solução padrão de nitrito a partir de NaNO₂ seco
- Padrões de trabalho de 0,01 a 0,2 mg/L de N
- Balões volumétricos de 50 mL e pipetas
- Membrana de 0,45 µm para amostras turvas
- Fotômetro ou colorímetro digital com método de diazotização para nitrito (reagente em sachê ou kit pronto)
Procedimento
- Preparo da amostraFiltre amostras turvas em membrana de 0,45 µm e acerte o pH entre 5 e 9 se for preciso.
- PadrõesPrepare o branco e pelo menos 4 padrões de nitrito em balões de 50 mL.
- Reação de corAdicione 2 mL do reagente de cor a 50 mL de amostra e de cada padrão e misture.
- Tempo de reaçãoEspere entre 10 minutos e 2 horas. Nesse intervalo a cor rosa fica estável.
- LeituraZere o espectrofotômetro com o branco e leia a absorbância em 543 nm.
- Controle de qualidadeEm cada lote, leia um padrão de verificação de concentração intermediária e uma amostra em duplicata. Refaça a curva se o padrão fugir do esperado.
- DiluiçãoSe a cor ficar mais forte que o padrão mais alto, dilua a amostra original e repita a reação.
- Alternativa digitalUse um fotômetro ou colorímetro digital com o método de diazotização do fabricante (mesma química, leitura perto de 540 nm). Serve para triagem e controle de processo. O laudo oficial segue o SM 4500-NO₂⁻ B.
Cálculo
Curva de calibração NO₂⁻-N (mg/L) = (A − b) / a × FD
- A: absorbância da amostra em 543 nm, já descontado o branco
- b: intercepto da reta de calibração
- a: inclinação da reta (absorbância por mg/L de N)
- FD: fator de diluição da amostra (1 se não houve diluição)
Conversão para nitrito NO₂⁻ (mg/L) = NO₂⁻-N (mg/L) × 3,284
- 3,284: razão entre as massas molares de NO₂⁻ e N
Coleta e preservação
Frasco de plástico ou vidro de 100 mL. Não acidifique, pois o ácido destrói o nitrito. Refrigere a no máximo 6 °C, sem congelar, e analise o quanto antes: o prazo máximo é de 48 horas.
Cuidados e segurança
- O reagente de cor contém ácido fosfórico e compostos aromáticos irritantes: use luvas e óculos.
- O nitrito de sódio é tóxico e oxidante: guarde longe de materiais combustíveis.