Materiais e reagentes
- HPLC com coluna de troca catiônica e sistema de reação pós-coluna
- Detector de fluorescência
- Hipoclorito de cálcio (oxidante pós-coluna)
- o-Ftalaldeído (OPA) e 2-mercaptoetanol
- Padrões de glifosato e AMPA
Procedimento
- InjeçãoInjete a amostra filtrada diretamente no HPLC com coluna de troca catiônica.
- Oxidação pós-colunaApós a separação, o glifosato é oxidado com hipoclorito a glicina.
- DerivatizaçãoA glicina reage com OPA e 2-mercaptoetanol, formando um produto fluorescente.
- Detecção e quantificaçãoMeça a fluorescência (excitação cerca de 340 nm, emissão cerca de 455 nm) e quantifique por curva de calibração.
- Controle de qualidadeAnalise branco e amostra fortificada em cada lote.
- AlternativaDerivatização pré-coluna com FMOC e análise por LC-MS/MS, comum em laboratórios comerciais, com limites de detecção menores.
Coleta e preservação
Coleta: Frasco de vidro com tampa revestida de PTFE. Preservação: Se houver cloro residual, adicionar tiossulfato de sódio. Refrigerar a ≤ 6 °C, ao abrigo da luz. Prazo: analisar em até 14 dias.
Cuidados e segurança
- Hipoclorito é corrosivo e libera cloro em contato com ácidos.
- OPA é tóxico e irritante. 2-mercaptoetanol é tóxico e tem odor forte. Prepare os reagentes em capela com luvas e óculos.