Materiais e reagentes
- Aparelho de destilação de vidro
- Espectrofotômetro com cubetas de 1 a 10 cm
- Funis de separação de 1 L (para a extração)
- Solução de 4-aminoantipirina (4-AAP)
- Solução de ferricianeto de potássio
- Tampão fosfato
- Clorofórmio
- Solução padrão de fenol
- Ácido fosfórico e sulfato de cobre (destilação)
Procedimento
- DestilaçãoDestile 500 mL da amostra (SM 5530 B) para separar os fenóis dos interferentes. A etapa é obrigatória neste método.
- Ajuste do pHAjuste o destilado a pH 7,9 ± 0,1 com o tampão fosfato.
- ReaçãoAdicione a 4-AAP e, em seguida, o ferricianeto de potássio. Em 3 minutos forma-se um corante avermelhado.
- Extração (SM 5530 C)Extraia o corante com clorofórmio no funil de separação e filtre o extrato. A extração deixa o método sensível para concentrações em µg/L.
- LeituraLeia a 460 nm no extrato em clorofórmio. Sem extração (SM 5530 D, para concentrações maiores), espere 15 minutos e leia a 500 nm na fase aquosa.
- CalibraçãoPrepare a curva com padrões de fenol tratados do mesmo jeito, incluindo um branco. O resultado sai como fenol (mg/L).
Coleta e preservação
Frasco de vidro. Acidifique com H₂SO₄ até pH < 2 e refrigere a cerca de 4 °C. Analise em até 28 dias.
Cuidados e segurança
- Fenol e clorofórmio são tóxicos, e o clorofórmio é possível cancerígeno: trabalhe em capela, com luvas e óculos.
- Descarte o clorofórmio como resíduo de solvente halogenado.
- O pH da reação é crítico e deve ser controlado com cuidado.