Análise de Coliformes Totais e E. coli

• Frasco de coleta estéril com tiossulfato de sódio (para amostras cloradas) (1)
• Meio de cultura de substrato cromogênico (ex: Colilert®) (1 pacote por amostra)
• Bandeja de quantificação com poços (ex: Quanti-Tray®) (1)
• Seladora para a bandeja (1)
• Incubadora a 35 ± 0.5 °C (1)
• Lâmpada UV (365 nm) (1)

1. Coleta da AmostraColete 100 mL de água em um frasco estéril, mantendo técnicas assépticas para evitar contaminação externa.
2. InoculaçãoAdicione o conteúdo de um pacote do meio de cultura à amostra de 100 mL. Tampe e agite vigorosamente até dissolver completamente.
3. Preenchimento da BandejaPara quantificar, despeje a mistura amostra/meio na bandeja de quantificação e passe pela seladora. Para presença/ausência, incube o próprio frasco.
4. IncubaçãoIncube a 35 ± 0,5 °C por 24 a 28 horas (Colilert) ou 18 a 22 horas (Colilert-18).
5. Leitura dos ResultadosApós a incubação, conte o número de poços que mudaram de cor (geralmente para amarelo) para determinar a presença de coliformes totais. Em seguida, observe a bandeja sob a lâmpada UV em um ambiente escuro. Conte o número de poços que apresentam fluorescência azul para determinar a presença de E. coli. Compare os números com a tabela de Número Mais Provável (NMP) fornecida pelo fabricante para obter o resultado em NMP/100 mL.
6. Controle de QualidadeEm cada lote de meio, teste cepas de controle positivo e negativo e um branco com água estéril.

Coleta: Frasco estéril de 100 mL ou mais, com tiossulfato de sódio se a água for clorada. Não enxágue o frasco. Preservação: Manter abaixo de 10 °C, sem congelar. Prazo: até 30 horas para água potável; para outras águas, o quanto antes (até 8 horas).